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層析硅膠應注意的操作問題有哪些

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層析硅膠應注意的操作問題有哪些

2021-09-10

層析硅膠應注意的操作問題有哪些,下面讓我們一起來學習一下吧!

 1、裝柱:

柱頭下邊的活塞桿一定不必涂潤滑液,會被滲濾劑送到商品中的,能夠選用四氟節門的。干式和濕式裝柱感覺沒有什么差別,只需可以把柱頭裝實就可以了。裝好的柱頭應當要適當的緊密(太密了滲濾劑走的很慢),一定要勻稱(要不然試品便會從一側斜著出來)。書里寫的全是不可以看到汽泡,我認為在絕大多數狀況下有一些氣泡沒很大的危害,一充壓汽泡就全出來了。自然假如你裝的柱頭一直有小氣泡就表明需要多訓練了??墒侵^更避諱的是裂開,不管豎的或是橫的,都是會危害分離出來實際效果,乃至廢止!

2、加樣:

用少許的有機溶劑溶試品加樣,加滿后將下邊的活塞桿開啟,待有機溶劑層降低至石英沙面時,再加少許的低極性溶劑,隨后再開啟活塞桿,這般兩三次,一般石英沙就基本上是灰白色的了。添加滲濾劑,一開始不必充壓,等溶試品的有機溶劑和試品層有一段距離(2~4cm就可以了),再充壓,那樣規避了有機溶劑(如二氯甲烷等)帶入試品迅速下滑。

層析硅膠

3、滲濾劑的挑選:

覺得上應使所需點在rf0.2~0.3上下的比較好。不必覺得在板往上爬高了分的非常開,過柱頭就用那類旋光性,假如rf在0.6,即便相距0.2也很難在柱頭上分離,由于柱頭是一個數次爬板的情況,能夠根據公式計算的較為:0.6/0.8一次的分離度,毫無疑問比不上(0.2/0.3)的三次方或四次方大

4、試品的搜集:

用硅橡膠作固定不動相過柱子的基本原理是一個吸咐與解析的均衡。因此假如試品與硅橡膠的吸咐比較強得話,就不易排出。那樣便會產生,后邊的點先出,而之前的點完出。這時候能夠 選用三氧化二鋁作固定不動相。此外,搜集的試管嬰兒尺寸要以試品量而定,尤其是少量試品,假如用大試管嬰兒,很有可能一根就收到了三個試品,wuwu。假如都用小試管嬰兒那勞動量又很大。

5、解決方法:

柱分后的商品,因為采用了大批量的有機溶劑,在其中的雜物也會累積商品中,因此要是想送剖析,用小量的有機溶劑清洗一下,由于絕大多數的殘渣是溶在有機溶劑里的,一洗基本上就沒了,需要時開展重結晶。


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