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柱層析硅膠的操作技巧

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柱層析硅膠的操作技巧

2021-08-25

柱層析硅膠的操作技巧都有哪些?

勻漿法:

1、秤重:200-300目硅膠,稱30-70倍于上樣量;倘若不容易分,還能夠用100倍量的硅膠H。干硅膠的視密度在0.4左右,因而要稱40g硅膠,使用量杯量100ml還能夠。

2、拌和成勻漿:加上干硅膠容量一倍的有機溶液用玻璃棒充裕攪拌。倘若過柱劑是醫用乙醚/甲基叔丁基醚/二甲苯體系管理,就用醫用乙醚拌;倘若過柱劑是醫用乙醚/醇體系管理,就用醫用乙醚拌。倘若不能拌和成勻漿,說明有機溶液中水份成分非常大,尤其是甲基叔丁基醚/二甲苯,倘若不與水配搭走分配色譜分析儀的話,盡量提早用無水硫酸鈉久置干燥。醫用乙醚用無水氯化鈣干燥,以除去1%的醇。倘若樣品對酸較為比較敏感,不能用醫用乙醚體系管理過柱。

3、裝柱:將柱底用棉花塞緊,不必用海沙,加上約1/3容量醫用乙醚(醫用乙醚),裝上蓄液球,打開柱下液壓缸,將勻漿一次落到蓄液球內。隨著著路基地基沉降,會發生一些硅膠沾在蓄液球內,用醫用乙醚(醫用乙醚)將其沖入柱中。

4、壓實:路基地基沉降開展后,加上很多的醫用乙醚,用雙連球或打氣泵沖裝,直至流動性速率平穩。柱床約被削減至9/10容量。無論走當然壓柱或沖裝柱,都應進行這一步,可使分離度提高 很多,且還能夠避免過柱時由于柱床委縮導致開裂。

柱層析硅膠

5、上樣:干試濕試都可以。海沙是沒必要的。上樣后,加上一些過柱劑,再將一團棉球塞至接近硅膠表面。接著就可以放心地加上許多過柱劑,而不易毀壞硅膠表面。

6、過柱和收集:柱層析實際上是在擴散和提取正中間的考量。太低的過柱抗拉強度并不大好,推薦用方向導數過柱。收集的例子:10mg上樣量,1g硅膠H,0.5ml收一減壓渣油;1-2g上樣量,50g硅膠(200-300目),20-50ml收一減壓渣油。

7、檢測:要很多地運用專用噴顯劑,倘若僅用紫外線消毒燈,會耗損較多產品,紫外光的敏感性一般比噴顯劑底1-2個數量級。

8、送譜:收集的產品旋干,在送譜前一般務必 重結晶。倘若樣品太少或是是為液體,可過一小凝膠柱,作為送譜前的純化方法??沙渥V1.5ppm左右簡言之的“硅膠”峰。

干試上樣,一般用于固體或粘度大的液體樣品。樣品用低溶點可溶解有機溶液溶化,加上1-3倍的粗硅膠,晾干或旋干,干燥的國家標準是硅膠成細粉而不粘在瓶內腔。安上的柱頂上留一段有機溶液,把吸咐了樣品的硅膠慢慢地到進去,震動柱頂或再加上一些有機溶液,把粘在柱內腔的硅膠洗下。

在裝柱頂的情形下,不論是濕試或者干試裝,用節橡皮管邊裝邊敲打,那般可以把柱頂裝的比較勻,僅有柱頂裝得勻,提取預期效果可以好。


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